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一、儲(chǔ)存條件

血清一般儲(chǔ)存于-20℃，同時(shí)應(yīng)避免反復(fù)凍融。若存放于4℃時(shí)，請(qǐng)勿超過(guò)一個(gè)月。

二、血清中絮狀沉淀的處理

沉淀包含纖維蛋白和脂蛋白，這是正常特性，不會(huì)影響產(chǎn)品性質(zhì)。

離心血清(400g，1-2分鐘)或簡(jiǎn)單的讓其沉淀在瓶子底部，將血清小心的轉(zhuǎn)移到另一個(gè)無(wú)菌瓶里。

大多情況輕輕搖動(dòng)沉淀并加熱至37℃就會(huì)再溶解。

一般不建議采用過(guò)濾的方法除去沉淀，因?yàn)槌恋頃?huì)堵塞濾膜而無(wú)法過(guò)濾。

三、使用濃度

一般為5-20%，常用是10%。過(guò)多血清容易使培養(yǎng)中的細(xì)胞發(fā)生變化，特別是一些二倍體的無(wú)限細(xì)胞系，迅速生長(zhǎng)之后容易發(fā)生惡性轉(zhuǎn)化。

四、解凍方法

血清從冰箱取出后應(yīng)慢慢地解凍。zh在4℃低溫冰箱里放置一天或直到*融化為止。如果時(shí)間不允許低溫解凍, 可參考以下解凍方法：

1. 將血清從冰箱里取出后，在室溫下放置15-20分鐘。

2. 然后將血清放置在37℃水浴槽里。過(guò)高溫度會(huì)導(dǎo)致血清出現(xiàn)渾濁現(xiàn)象。不要讓水淹沒(méi)裝有血清的瓶子。

3. 每隔5分鐘左右適當(dāng)搖晃瓶子，直到*地解凍為止。

五、熱滅活方法

加熱可以滅活補(bǔ)體系統(tǒng)。激活的補(bǔ)體參與溶解細(xì)胞事件，刺激平滑肌收縮，細(xì)胞和血小板釋放組胺，激活淋巴細(xì)胞和巨噬細(xì)胞。在免疫學(xué)研究，培養(yǎng)ES細(xì)胞、平滑肌細(xì)胞時(shí)，推薦使用熱滅活血清。若必須做血清的熱滅活，請(qǐng)遵守56℃，30分鐘的原則，并且隨時(shí)搖晃均勻。血清的熱滅活非常容易造成沉淀物的增多，若非必要，可以無(wú)須做此步驟。

1. 用上述描述的方法將血清在低溫冰箱或室溫下解凍。

2. 在血清解凍時(shí)，將一個(gè)容器裝入適量的水，用于模擬裝有血清瓶子在熱處理過(guò)程中檢測(cè)瓶?jī)?nèi)水的溫度。容器大小、質(zhì)地和裝水的量zh與裝血清的瓶子相同或相似。

3. 待血清*解凍時(shí)，將含有血清的瓶子放在預(yù)熱的56℃水浴里，不要將含有血清的瓶子讓水淹沒(méi)或接近瓶子的蓋子，以免導(dǎo)致污染。

4. 在開(kāi)始加熱處理時(shí)，要及時(shí)使用溫度計(jì)測(cè)定模擬瓶?jī)?nèi)水的溫度。

5. 在預(yù)熱期間，每隔3-5分鐘要適當(dāng)搖晃含有血清和水的瓶子，確保瓶?jī)?nèi)液體均勻加熱。

6. 一旦模擬瓶?jī)?nèi)的水溫達(dá)到55.8±0.5℃時(shí)，開(kāi)始計(jì)時(shí)，并在此溫度范圍內(nèi)熱處理30分鐘，然后立即放在冰上冷卻。

為防止在熱處理過(guò)程中由蛋白質(zhì)變性而導(dǎo)致的渾濁和沉淀現(xiàn)象，熱處理時(shí)應(yīng)注意下列事項(xiàng)：

1. 不要用高于25℃以上的溫度加快解凍速度。

2. 在熱處理之前，要使血清*融解。

3. 不要使熱處理的溫度高于56.3℃

4. 熱處理時(shí)間不要長(zhǎng)于30分鐘。

5. 在加熱過(guò)程中一定要定時(shí)搖動(dòng)血清。

六、避免事項(xiàng)

1.避免反復(fù)凍融

長(zhǎng)時(shí)間儲(chǔ)存在2-8℃時(shí)，血清中的各種蛋白和脂蛋白可能聚集而形成沉淀或可見(jiàn)的混濁。

2.避免產(chǎn)生沉淀

解凍血清時(shí)，請(qǐng)隨時(shí)將之搖晃均勻，使溫度及成分均一，減少沉淀的發(fā)生。

血清分裝時(shí)，須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡)，使溫度與成分均一。

勿直接由-20℃直接至37℃解凍，因溫度改變太大，容易造成蛋白質(zhì)凝結(jié)而發(fā)生沉淀。

勿將血清置于37℃太久，否則血清會(huì)變得渾濁，同時(shí)血清中許多較不穩(wěn)定的成份也會(huì)因此受到破壞，從而影響血清的品質(zhì)。

七、建議事項(xiàng)

一旦您在新鮮培養(yǎng)基中添加了血清和抗生素時(shí)，您應(yīng)該在兩到三周內(nèi)使用它。因?yàn)橐恍┛股睾脱逯械幕境煞衷诮鈨龊缶烷_(kāi)始降解。(100U/mL青霉素；100µg/mL鏈霉素)